陕西商人周仁瑞外出经商，将幼子托付给弟弟周仁祥抚养。十六年后，周仁瑞回乡欲领回儿子，却遭弟媳王氏百般阻挠。王氏为霸占家产，诬陷周仁瑞之子并非亲生，并利用滴血认亲之法，让周仁瑞与儿子滴血，不料血液相融，王氏又谎称此乃伪造。周仁瑞无奈告官，县令昏庸，轻信滴血认亲，错判儿子归王氏。后经高人指点，周仁瑞发现滴血认亲实乃荒谬，真正的亲子鉴定需以父母与子女三滴血相验。最终，三滴血验证真相大白，父子团聚。影片以秦腔艺术形式，深刻批判了封建迷信的荒唐，歌颂了父爱的执着与正义的胜利。